分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素c的含量

'第4卷第3期中国无机分析化学V01．4，NO．32014年9月ChineseJournalofInorganicAnalyticalChemistry79～81doi：10．3969I／j．issn．2095—1035．2014．03．018分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C的含量李占清魏海英(河北大学化学与环境科学学院，河北保定071002)摘要水溶性的维生素C是一种人体必需的营养物质。维生素C是含有烯二醇基的多羟基内酯结构，利用其水溶液在波长265nm处有较强烈的紫外吸收峰，建立了直接用紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C含量的方法。实验结果表明，维生素C的含量在1．0～12．0pg／mL内线性关系良好，线性方程为A=0．06603f+o．01974(R2一o．99751)．检出限为0．044og／rrd。，样品加标回收率为97．5％～105．4％。方法操作简单，准确度高，对新鲜蔬菜的测定结果令人满意。关键词新鲜蔬菜；维生素c；紫外分光光度法中图分类号：0657．32；TH744．12+2文献标志码：A文章编号：2095—1035(2014)03—0079—03DeterminationofContentsofVitaminCinFreshVegetablesbyUVSpectrophotometryLIZhanqing，WEIHaiying。(CollegeofChemistryandEnvironmentalScience·HebeiUniversity，Baoding，Hebei071002，China)AbstractSolublevitaminC(Vc)isanessentialnutrientforhumanbeings．VccontainsenediolmoietyinapolyhydroxylactonestructureAspectrophotometricmethodforthedirectdeterminationofVccontentinfreshvegetableswasestablished，becauseVcaqueoussolutionhasrelativestrongcharacteristicabsorbanceat265nm．Agoodlinearrelationshipwasobtainedintherangeof1．0～12．0btg／mLoftheVccontent．TheregressionequationwasA一0．06603f+0．01974(R2—0．99751)．Thedetectionlimitwas0．044btg／mLwiththerecoveriesof97．5％～105．4％．Themethodwassimpleandaccurate．ItcanmeettherequirementsforthedeterminationofVcinfreshvegetablesampleswithsatisfactoryresults．Keywordsfreshvegetable；vitaminC；UVspectrophotometry能自身合成维生素C，只能通过合理膳食得到，因此，0前日准确测定蔬菜中维生素C的含量具有重要意义。水溶性维生素C又名L一抗坏血酸，主要存在于蔬菜中维生素C含量的测定一般采用2，4一二新鲜蔬菜和水果中，具有美白养颜、预防感冒、增强硝基苯肼法、荧光分光光度法、碘量法和2，6一二氯免疫系统功能等作用，对坏血病、动脉硬化、贫血等靛酚滴定法等[1{]，这些方法都有一定的缺点，比如有一定疗效，可以预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿操作程序复杂、所用试剂不稳定、时间长等。根据维和牙龈等，是维持人体正常代谢的必需物质。人体生素C的结构特点确定了其水溶液最大吸收波长严重缺乏维生素C时会导致坏血病，而且体内又不为265nm，并且分光光度法应用普遍邸1，因此，建收稿日期：2014—03—07修回日期：2014—03—18基金项目：河北省科技厅科技支撑项目(112764351)资助作者简介：李占清，女，在读硬士研究生。’通信作者：魏海英，女，副教授，硬士生导师。主要从事无机分析及配位化学研究。E—mail：weihy@hbu．edu．cn万方数据 80中国无机分析化学2014焦立了紫外分光光度法的工作曲线，选取了几种新鲜蔬菜作为样品进行测定。方法具有操作简便、准确、快速、检出限低的优点。1实验部分1．1仪器与试剂TU一1810紫外可见分光光度计(北京普析通用有限公司)，PHS一3C型酸度计(上海伟业仪器有限公司)，分析天平，组织捣碎机，吸量管，容量瓶，纱布，移液管。维生素C标准储备溶液(1．0mg／mL)：称取图1维生素C溶液的吸收曲线1AbsorptioncurveofvitaminCsolution．0．1g(精确至0．1rag)抗坏血酸，溶于蒸馏水中，定量转Figure移人100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释定容，摇匀。移，这是由于维生素C在碱性环境中不稳定分解引起维生素C标准溶液(0．1mg／mI。)：将标准储备的。这与文献r1]报道一致。溶液稀释而得。1．2实验方法1．2．1绘制工作曲线分别移取0．00，1．00，2．oO，4．00，6．00，8．00，10．00，12．00mL维生素C的标准溶液于100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀。以蒸馏水为参比，在A。。=265nm处测定吸光度，并以吸光度为纵坐标，维生素C标准溶液浓度为横坐标，作标准曲线。1．2．2样品的测定将菠菜、白菜、芹菜、土豆、胡萝卜五种新鲜蔬菜样品洗净，擦干，称取一定量具有代表性样品的可食图2pH对吸收波长的影响部分，加入少量的水，迅速捣成匀浆，用二层纱布过Figure2EffectofabsorbtionwavelengthonpH．滤。用水将样品移人100mL容量瓶中，并稀释至2．3线性关系及检出限刻度，摇匀。以蒸馏水为参比，在A。。。一265nm处，由图3可知，维生素C的质量浓度在1．0～测定试样吸光度。12．0p．g／mI。范围内呈线性关系，线性回归方程为2结果与讨论A一0．06603c+0．01974，相关系数R2—0．99751。同时，以蒸馏水做空白测定，计算标准偏差为2．1最大吸收波长的确定以蒸馏水为参比，取6．00mL的维生素C标准溶液，在200～350am范围内对其进行光谱扫描，结果如图1所示。从图1可知最大吸收波长A一=265D．m。2．2酸度对吸收波长的影响婪螫用移液管分别加入1mL维生素C标准溶液于50螂量瓶中，用HCl或NaOH调pH值，蒸馏水稀释至刻度，测定不同pH值下的维生素C的最大吸收波长，实验结果如图2所示，实验表明，pH值在5．o～02468101210．0时的最大吸收波长不变，为265nm，但pH一6．0维生素C的浓度／Oag·rTlL‘1)时的吸收值最大，故选择pH值为6．0。当pH<5．0图3维生素C溶液的标准曲线时，最大吸收波长紫移，可能是因为维生素C以离子化Figure3AstandardcurveofvitaminCsolution．形式存在造成的。当pH>12．0时，最大吸收波长红万方数据 第3期李占清等：分光光度法测定新鲜蔬菜中维生素C的含量810．0982％，得到检出限为0．044pg／mI。。豆、胡萝卜为样品，按照实验方法测定了其中维生素2．4样品测定结果C的含量，结果见表1。实验中选取了新鲜蔬菜大白菜、菠菜、芹菜、土表1蔬菜中维生素C的含量TablelContentsofvitaminCinvegetables／(mg·g-1)2．5加标回收实验匀。测定该溶液的吸光度并从标准曲线上得到所测准确吸取上述实验方法中稀释后的蔬菜溶液定的50mL容量瓶中含有维生素C的对应含量。25．00mI．于50mL容量瓶中，加0．5mI。维生素C结果如表2所示。实验结果表明，加标回收率稳定标准溶液(100ptg／mL)，用蒸馏水稀释至刻度线，摇在97．50A～105．4％，方法准确可靠。表2加标回收实验结果Table2Resultsofrecoverytests／ag2．6稳定性实验参考文献将含量测定中所配制的五种蔬菜样品溶液，在间隔不同时间内进行吸光度测量。结果发现在10hEli李元玲，贺龙强．紫外分光光度法测定新鲜蔬菜中维生内，样品的吸光度几乎没有变化。虽然具有还原性素c的含量[J]．焦作大学学报，2011(3)：93—94．V23马宏飞，卢生有，韩秋菊，等．紫外分光光度法测定五种的维生素C易被氧化，但在一定时间内，pH一6．0果蔬中维生素C的含量[J]．化学与生物工程，2012，的介质中能稳定存在。29(8)：92—94．E3J武文，周俊敏，宣亚文．催化动力学光度法测定黄瓜、青3结语蒜中维生素cEJ3．广东农业科学，2010(6)：15卜152．[4]于晓萍．分光光度法快速测定蔬菜水果中维生素C的水溶性维生素C具有含有烯二醇基的多羟基含量[J]．工程技术与应用，2009，6(2)：16-18．内酯结构而在紫外区有特征吸收；详细考察了不同[5]斯琴格日乐，恩德．丝瓜中维生素C含量的测定EJ3．广pH值时特征吸收波长。结果表明：在pH一6．0时，东微量元素科学，2010，17(4)：52—55．维生素C能稳定存在，且有最大吸光度。在1．0～[6]雷天乾，高琳，党明安，等．抗坏血酸(维生素C)溶液紫外吸收光谱研究[J]．光谱学与光谱分析，1998，18(4)：12．0pg／ml。的质量浓度范围内，维生素C浓度与吸149—150．光度呈良好的线性关系，线性方程为：A一0．06603c+[7]陈爱敏，魏海英．分光光度法测定硒盐中的硒(IV)含0．01974，相关系数R2一o．99751。选取的五种常见蔬量[J]．中国无机分析化学，2012，2(4)：70—73．菜中维生素C的含量分别为：白菜0．6456rag／g，[8]蔡顺香．紫外分光光度法测定芦柑中的还原型维生素c[J]．光谱实验室，2009，26(5)：109卜1094．菠菜1．9480mg／g，芹菜0．32l4mg／g，土豆[9]孙义．水果和蔬菜中维生素C含量的测定方法综述[J]．0．5591mg／g，胡萝卜0．311mg／g。该方法简单易天津化工，2008，22(3)：58—59．行，准确度高，稳定性好。[10]孙振艳，赵中一，郭小慧，等．荧光分析法测定维生素cEJ]．化学分析计量，2006，15(4)：18—20．万方数据'